ولد الفنان مصطفى متولي بمدينة بيلا في محافظة كفر الشيخ، وفي ٢٩ أغسطس ١٩٤٩، وأثناء دراسته الثانوية ظهرت موهبته في التمثيل حين كان يمثل في الفريق المسرحى للمدرسة، ثم انتقل إلى القاهرة، والتحق بمعهد الفنون المسرحية، ثم عمل في مسرح الحكيم.
شارك متولى في الكثير من الأعمال السينمائية والمسرحية والتليفزيونية، وكان بعض أدواره أدوارا أولى وبعضها دوراً ثانياً، ونجده قاسما مشتركا في أكثر من فيلم للفنان عادل إمام،ومن الأفلام التي شارك فيها جزيرة الشيطان والإرهابى والإرهاب والكباب وشمس الزناتى واللعب مع الكبار وسلام يا صاحبى وعنتر شايل سيفه.
كما شارك في أفلام الراقصة والسياسى وبخيت وعديلة والمنسى وحنفى الأبهة ورسالة إلى الوالى والمولد ومسجل خطر وبلاغ للرأى العام وعش الغراب وحتى لا يطير الدخان ووداد الغازية وضربة شمس.
وشارك مع الفنان عادل إمام في معظم مسرحياته، ومنها الواد سيد الشغال وبودى جارد ومن أشهر المسلسلات التي شارك فيها بكيزة وزغلول ورأفت الهجان وحياة الجوهرى وأم كلثوم ولن أعيش في جلباب أبى وخيوط من ذهب وأوبرا عايدة وهارون الرشيد وعمر بن عبدالعزيز وسامحونى ما كنش قصدى وعلى بابا والأربعين حرامى والبرارى والحامول وحلم الجنوبى والسقوط في الهاوية والثعلب وأنا وإنت وبابا في المشمش.
وكان مصطفى متولى بعد انتهائه من أحد عروض بودى جارد «زي النهارده» في ٥ أغسطس ٢٠٠٠ داهمته أزمة قلبية مفاجئة توفى على إثرها، وأعلنت حالة الحداد بين أسرة المسرحية، وتوقفت عروضها بناء على قرار الفنان عادل إمام وهو شقيق زوجة مصطفى وخال أولاده، كما تعطل تصوير مسلسلين آخرين كان متولى مشاركا فيهما.